1、elisa酶聯免疫試劑盒說明書溫育的影響
溫育是影響ELISA測定結果的關鍵因素。溫育時間不夠，弱陽性標本檢測不出；溫育溫度不夠，弱陽性標本也難以檢出。
2、洗板的影響 
洗板對ELISA測定來說也是關鍵步驟。洗板分手工洗板和機器洗板，一般認為機器洗板較手工洗板效果要好，關鍵是洗板次數的選擇。洗板次數較少，造成殘留，可引起假陽性結果；洗板次數過多，可造成抗原抗體結合物洗脫，造成假陰性結果。
3、 elisa酶聯免疫試劑盒說明書顯色的影響 
影響顯色的關鍵是顯色溫度和顯色時間，有些實驗室操作人員不嚴格按說明書操作，因為擔心“花板"，往往是顯色時間不到就匆忙終止顯色，結果造成弱陽性標本不能顯色而導致假陰性發生。
4、加樣的影響 
加入樣品、試劑及混勻時間的差異稱為操作時差。操作時差在每個試驗中都存在，尤為手工操作更著，對結果都會產生或大或小的影響。ELISA常用項目，例如：乙肝兩對半，多是成批檢測。從加*個樣本到zui后一個樣本，包括中間換吸管尖的工作，在這一過程中有一個時間差；加試劑及混勻也同樣存在時間差，這種操作時間差會致使抗原抗體反應和酶促反應時間的不一致，而這種不一致可以直接導致誤差的產生，尤其是在夏天，若不合理安排時間、盡量減少時差，將會導致假陽性或假陰性的結果出現。
ELISA檢測法影響因素眾多，上述只是一些常見因素分析。要想提高ELISA檢測的檢測質量，關鍵還要加強實驗室科學管理，強化標準化流程操作，加強質量控制，提高人員素質，以減少檢測假陽性、假陰性結果的發生。elisa酶聯免疫試劑盒說明書