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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞小鼠心臟干細(xì)胞
小鼠心臟干細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠心臟干細(xì)胞的相關(guān)*:體液乙酰酯活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
乙酰酯活性抑制劑篩選比色法檢測(cè)試劑盒 20次
通用型乙酰酯活性熒光法定量檢測(cè)試劑盒 20次
細(xì)胞乙酰酯活性熒光法定量檢測(cè)試劑盒 20次
組織乙酰酯活性熒光法定量檢測(cè)試劑盒 20次
血液乙酰酯活性熒光法定量檢測(cè)試劑盒 20次

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時(shí)間:2025-02-17
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:366
詳細(xì)介紹在線留言
品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X1107
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

小鼠心臟干細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1107

商品介紹:

名稱    小鼠心臟干細(xì)胞 

2.組織來源:心臟組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠心臟干細(xì)胞分離自心臟組織;心臟是脊椎動(dòng)物身體中最重要的一個(gè)器官,主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。研究發(fā)現(xiàn),心臟干細(xì)胞是一種多潛能細(xì)胞,具有再生和克隆能力,并可分化為心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞。體內(nèi)研究顯示,從心臟中分離出的心臟干細(xì)胞,經(jīng)體外簡(jiǎn)單培養(yǎng)、增殖和標(biāo)記后,移植到心肌梗死邊緣區(qū)域,心梗血流動(dòng)力學(xué)和心室壁厚度較對(duì)照組明顯改善,心肌梗死邊緣區(qū)域發(fā)現(xiàn)有標(biāo)記的心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。盡管其新生心肌細(xì)胞較小,但表達(dá)一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動(dòng)蛋白、α-輔肌動(dòng)蛋白、連接蛋白等,證實(shí)了心臟干細(xì)胞對(duì)心肌梗死的修復(fù)作用。干細(xì)胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細(xì)胞重建的主要方法,成體干細(xì)胞中的c-kit陽性心臟干細(xì)胞因其來源于心臟,有定向心臟細(xì)胞系分化的趨勢(shì),體內(nèi)外可以分化成心肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞,同時(shí)自體移植不存在免疫排斥反應(yīng)及倫理問題已經(jīng)成為目前研究的熱點(diǎn)。短期內(nèi)獲得治療量的自體心臟干細(xì)胞是這一治療應(yīng)用于臨床的關(guān)鍵所在。因此,研究一種新的分離培養(yǎng)方法可在短時(shí)期內(nèi)獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細(xì)胞成為目前干細(xì)胞領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)問題之一。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心臟干細(xì)胞采用機(jī)械剪碎組織、膠原酶分次消化法結(jié)合差速貼壁、心臟干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心臟干細(xì)胞經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M135

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)長(zhǎng)梭形

傳代特性可傳2-3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 MEP1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 tsukushin 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 PIGR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 FABP2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 IL1F1 / IL1α 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 IL36RN / IL1F5 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 IL36RN / IL1F5 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

 IL36G / IL1F9 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 IL36G / IL1F9 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

 IL1RN / IL1F3 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

小鼠心臟干細(xì)胞0.156-10 ng/ml 人凝血噁烷A合成(TXA synthase)ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Protransforming growth factor alpha

0.156-10 ng/mL 人間α-抑制因子重鏈H5(ITIH5L)ELISA試劑盒

Honda氏產(chǎn)毒肉湯 英文名稱:Honda Toxin-Producing Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cystine/glutamate transporter

15.6-1000 ng/mL 硫酸軟骨素(CS)ELISA試劑盒

梭菌強(qiáng)化培養(yǎng)基 英文名稱:Reinforced medium for clostridia 產(chǎn)品規(guī)格:250g

225ml FB1增菌液均質(zhì)袋 英文名稱:FB1 Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包

3.9-250 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein(a)

0.156-10 ng/mL 鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)

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