細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

WSU-DLCL2細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持WSU-DLCL2細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含WSU-DLCL2細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于WSU-DLCL2細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基                               445 mL

特級(jí)胎牛血清                                              50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat telomerase (TE) ELISA Kit 大鼠端粒酶(TE)試劑盒

Humanαmannosidase,αManaseELISAKit 人α甘露糖苷酶(αManase)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitfor(MMP-7(HumanMaixmetalloproteinase7)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶7

印跡覆膜結(jié)合(BLOTOVERLAYBINDING)同位素試劑盒5次

MouseIerleukin3,IL-3ELISAKit小鼠白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒 ，英文名： CR ELISA Kit

Porcine factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物TE基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMCF(Humanmacrophagechemotaticfactor)ELISAKit人巨噬細(xì)胞趨化因子

體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1(ACE1)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitGH馬生長激素

小鼠孕   英文名稱：   Progesterone   英文縮寫：   PROG

小鼠1型前膠原羧基端原肽   英文名稱：   Mouse C-Terminal Propeptide of type I collagen    英文縮寫：   PICP

小鼠甲狀旁腺激素   英文名稱：   Mouse Parathormone   英文縮寫：   PTH

小鼠過氧化物酶體增殖物活化受體γ   英文名稱：   Mouse Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ   英文縮寫：   PPARγ

Kelch樣蛋白15抗體

EMID2蛋白抗體

CCL21重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein

MMP-14(Matrix metalloproteinase-14 0.5mgMMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 金屬基質(zhì)蛋白酶-14

FGF21重組人 FGF21 蛋白 Protein

CD300LG Protein Human 重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白

IL27 Protein Mouse 重組小鼠 IL27 / Interleukin-27 蛋白

WSU-DLCL2 細(xì)胞專用培養(yǎng)基MMP-14(Matrix metalloproteinase-14 0.5mgMMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 金屬基質(zhì)蛋白酶-14

CD300LG Protein Human 重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白

CCL21重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein

IL27 Protein Mouse 重組小鼠 IL27 / Interleukin-27 蛋白

FGF21重組人 FGF21 蛋白 Protein