細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

兔原代肝外膽管上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持兔原代肝外膽管上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產品中已包含兔原代肝外膽管上皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代肝外膽管上皮細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

抵抗素(RETN)重組蛋白 Recombinant Resistin (RETN)

FES Protein Human 重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標簽)

EPO重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標簽) Protein

EPHA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EphA4 蛋白 (His 標簽)

PMM2重組人 Phosphomannomutase 2 / PMM2 / CDG1 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠成纖維細胞生長因子2(FGF2/bFGF)試劑盒 ，英文名： FGF2/bFGF ELISA Kit

Mouse factor B (BF) ELISA Kit 小鼠B因子(BF)試劑盒

ELISA 小鼠補體C3a(mouse C3a)  進口分裝

CLIAKitforLepIgGISAKit大鼠鉤端IgG

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ELISAKitα1-MGα1微球蛋白

細胞凋亡-Hoechst染色試劑盒   100次

HoechstStainingKit

Kisser封片液   10ml

Kisser'sMouingMedium

小鼠凋亡信號調節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA 試劑盒

Human myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 人髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒

HumancoagulationfactorⅫ,FⅫELISAKit 人Ⅻ(FⅫ)試劑盒 進口分裝

HumanArginase,Arg試劑盒人精酶(Arg)試劑盒

植物源性食品核桃(waln)試劑盒20次

Humahyroglobulin，TGELISAKit人甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒

MAP激酶相互作用絲/蘇激酶2抗體

含賴卷曲螺旋蛋白1抗體

兔原代肝外膽管上皮細胞專用培養(yǎng)基CFD重組小鼠 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白 (His 標簽) Protein

5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin 0.5mg5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 (aa 563-987, His & GST 標簽) Protein

FES Protein Human 重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標簽)

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)