細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

人原代氣管上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代氣管上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代氣管上皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代氣管上皮細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產(chǎn)品：

NKB (Neurokinins B 0.5mgNKB (Neurokinins B) 神經(jīng)激肽B(抗原)

CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白

FGF14重組狗 FGF14 / SCA27 蛋白 Protein

CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白

PTX3重組人 PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-14 蛋白 Protein

大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒 ，英文名： DPPⅣ ELISA Kit

Porcine endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 豬內皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒

鵝特定基因序列(Goose)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforM30(MouseEmbryonicStemMESPU30)ELISAKit小鼠胚胎干細胞系MESPU30

體液誘導型巨噬細胞合成酶(iNOS/NOS2/mNOS)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitAIL-R3雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3

小鼠抑制素A   英文名稱：   Insulin A   規(guī)格：      英文縮寫：   Inhibin A

小鼠抑制素B   英文名稱：   Insulin B   規(guī)格：      英文縮寫：   Inhibin B

小鼠干擾素誘導蛋白IP-10   英文名稱：   induced protein 10   規(guī)格：      英文縮寫：   IP-10

小鼠8異前列腺素   英文名稱：   8-isoprostane F2α   規(guī)格：      英文縮寫：   8-iso-PG

小鼠血清(NO)ELISA 試劑盒 96T/48T

One target of rapamycin (mTOR) ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒

Humanβ-lactamaseELISAKit 人β內酰胺酶(β-lactamase)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor(BAX)RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit大鼠Bcl-2相關X蛋白

熒光穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升

MouseIerleukin16,IL-16ELISAKit小鼠白介素16(IL-16)試劑盒規(guī)格：96T/48T

?磷酸葡萄糖變位酶/?-phosphoglucomutase抗體

NFKB激活蛋白1抗體

人原代氣管上皮細胞專用培養(yǎng)基IL2RG重組小鼠 IL2RG 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CK18(Cytokeratin 18 0.5mlCK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18抗原(C端)

N6AMT1重組人 N6AMT1 / HEMK2 蛋白 Protein

CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白

CD200R1 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標簽)

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。